Pokud vám lékař doporučil karyotypový test pro vás nebo vaše dítě nebo po amniocentéze, co to znamená? Jaké podmínky může karyotyp diagnostikovat, jaké jsou kroky při provádění testů a jaká jsou jeho omezení?
PASIEKA / SPL / Getty ImagesCo je to test karyotypu?
Karyotyp je fotografie chromozomů v buňce. Karyotypy lze odebírat z krvinek, kožních buněk plodu (z plodové vody nebo placenty) nebo z buněk kostní dřeně.
Podmínky diagnostikované testem karyotypu
Karyotypy lze použít k screeningu a potvrzení chromozomálních abnormalit, jako je Downův syndrom a syndrom kočičích očí, a lze detekovat několik různých typů abnormalit.
Chromozomální abnormality:
- Trizomie, ve kterých jsou tři kopie jednoho z chromozomů spíše než dva
- Monosomie, ve kterých je přítomna pouze jedna kopie (místo dvou)
- Delece chromozomů, u kterých chybí část chromozomu
- Translokace chromozomů, ve kterých je část jednoho chromozomu připojena k jinému chromozomu (a naopak ve vyvážených translokacích.)
Mezi příklady trizomií patří:
- Downův syndrom (trizomie 21)
- Edwardův syndrom (trizomie 18)
- Patauův syndrom (trizomie 13)
- Klinefelterův syndrom (XXY a další varianty) - Klinefelterův syndrom se vyskytuje u 1 z 500 novorozených mužů
- Syndrom trojitého X (XXX)
Příklad monosomie zahrnuje:
- Turnerův syndrom (X0) nebo monosomie X - Zhruba 10% potratů v prvním trimestru je způsobeno Turnerovým syndromem, ale tato monosomie je přítomna pouze u přibližně 1 z 2500 živě narozených žen
Mezi příklady chromozomálních delecí patří:
- Cri-du-Chat syndrom (chybějící chromozom 5)
- Williamsův syndrom (chybějící chromozom 7)
Translokace - Existuje mnoho příkladů translokací, včetně translokace Downova syndromu. Robertsonské translokace jsou poměrně běžné a vyskytují se zhruba u 1 z 1000 lidí.
Mosaicismus je stav, kdy některé buňky v těle mají chromozomální abnormalitu, zatímco jiné nikoli. Například mozaikový Downův syndrom nebo mozaiková trizomie 9. Úplná trizomie 9 není kompatibilní se životem, ale mozaiková trizomie 9 může mít za následek živé narození.
Když je hotovo
Existuje mnoho situací, kdy vám lékař může doporučit karyotyp. Mohou zahrnovat:
- Kojenci nebo děti se zdravotním stavem, který naznačuje chromozomální abnormalitu, která dosud nebyla diagnostikována.
- Dospělí, kteří mají příznaky naznačující chromozomální abnormalitu (například muži s Klinefelterovou chorobou, mohou zůstat nediagnostikovaní až do puberty nebo dospělosti.) Některé poruchy mozaikové trizomie mohou také zůstat nediagnostikované.
- Neplodnost: Pro neplodnost lze použít genetický karyotyp. Jak je uvedeno výše, některé chromozomální abnormality mohou zůstat nediagnostikované až do dospělosti. Žena s Turnerovým syndromem nebo muž s jednou z variant Klinefelterovy choroby si nemusí být vědoma tohoto stavu, dokud se nevyrovná s neplodností.
- Prenatální testování: V některých případech, jako je translokační Downov syndrom, může být tento stav dědičný a rodiče mohou být vyšetřeni, pokud se dítě narodilo s Downovým syndromem. (Je důležité si uvědomit, že Downov syndrom většinou není dědičnou poruchou, ale spíše náhodnou mutací.)
- Mrtvé narození: Karyotyp se často provádí jako součást testování po mrtvém narození.
- Opakující se potraty: Rodičovský karyotyp opakovaných potratů může poskytnout vodítka o důvodech těchto ničivých opakujících se ztrát. Předpokládá se, že chromozomální abnormality, jako je trizomie 16, jsou příčinou nejméně 50% potratů.
- Leukémie: Testování karyotypů může být také provedeno za účelem diagnostiky leukémií, například hledáním chromosomu Philadelphia nalezeného u některých lidí s chronickou myeloidní leukémií nebo akutní lymfocytární leukémií.
Zapojené kroky
Test karyotypu může znít jako jednoduchý krevní test, díky čemuž se mnoho lidí diví, proč trvá tak dlouho, než se dostaví výsledky. Tento test je ve skutečnosti po sběru poměrně složitý. Pojďme se podívat na tyto kroky, abyste pochopili, co se děje v době, kdy čekáte na test.
1. Odběr vzorků
Prvním krokem při provádění karyotypu je shromáždění vzorku. U novorozenců se odebírá vzorek krve obsahující červené krvinky, bílé krvinky, sérum a další tekutiny. Karyotyp bude proveden na bílých krvinkách, které se aktivně dělí (stav známý jako mitóza). Během těhotenství může být vzorkem buď plodová voda odebraná během amniocentézy, nebo kousek placenty odebraný během testu vzorkování choriových klků (CVS). Plodová voda obsahuje fetální kožní buňky, které se používají k vytvoření karyotypu.
2. Transport do laboratoře
Karyotypy se provádějí ve specifické laboratoři zvané cytogenetická laboratoř - laboratoř, která studuje chromozomy. Ne všechny nemocnice mají cytogenetické laboratoře. Pokud vaše nemocnice nebo zdravotnické zařízení nemá vlastní laboratoř pro cytogenetiku, testovací vzorek bude odeslán do laboratoře, která se specializuje na analýzu karyotypů. Testovaný vzorek analyzují speciálně vyškolení cytogenetičtí technologové, Ph.D. cytogenetici nebo lékařští genetici.
3. Oddělení buněk
Aby bylo možné analyzovat chromozomy, musí vzorek obsahovat buňky, které se aktivně dělí. V krvi se bílé krvinky aktivně dělí. Většina buněk plodu se také aktivně dělí. Jakmile vzorek dorazí do cytogenetické laboratoře, jsou nedělící buňky odděleny od dělících buněk pomocí speciálních chemikálií.
4. Rostoucí buňky
Aby bylo k dispozici dostatek buněk k analýze, dělící se buňky rostou ve speciálním médiu nebo v buněčné kultuře. Toto médium obsahuje chemikálie a hormony, které buňkám umožňují dělení a množení. Tento proces kultivace může trvat tři až čtyři dny u krvinek a až týden u buněk plodu.
5. Synchronizace buněk
Chromozomy jsou dlouhý řetězec lidské DNA. Aby bylo možné chromosomy vidět pod mikroskopem, musí být ve své nejkompaktnější formě ve fázi buněčného dělení (mitózy) známé jako metafáze. Aby se všechny buňky dostaly do této specifické fáze buněčného dělení, jsou buňky ošetřeny chemickou látkou, která zastaví dělení buněk v bodě, kde jsou chromozomy nejkompaktnější.
6. Uvolnění chromozomů z jejich buněk
Aby bylo možné tyto kompaktní chromozomy vidět pod mikroskopem, musí být chromozomy mimo bílé krvinky. To se provádí ošetřením bílých krvinek speciálním roztokem, který způsobí jejich prasknutí. To se provádí, když jsou buňky na mikroskopickém sklíčku. Zbytky zbytků bílých krvinek jsou odplaveny a chromozomy zůstávají na sklíčku.
7. Barvení chromozomů
Chromozomy jsou přirozeně bezbarvé. Aby bylo možné rozeznat jeden chromozom od druhého, nanese se na sklíčko speciální barvivo zvané Giemsa dye. Barvivo Giemsa obarví oblasti chromozomů, které jsou bohaté na báze adenin (A) a thymin (T). Po obarvení vypadají chromozomy jako řetězce se světlými a tmavými pruhy. Každý chromozom má specifický vzor světlých a tmavých pruhů, které umožňují cytogenetikovi rozeznat jeden chromozom od druhého. Každý tmavý nebo světlý pás zahrnuje stovky různých genů.
8. Analýza
Jakmile jsou chromozomy obarveny, sklíčko je vloženo pod mikroskop pro analýzu. Poté se pořídí snímek chromozomů. Na konci analýzy bude stanoven celkový počet chromozomů a chromozomy budou uspořádány podle velikosti.
9. Počítání chromozomů
Prvním krokem analýzy je spočítání chromozomů. Většina lidí má 46 chromozomů. Lidé s Downovým syndromem mají 47 chromozomů. Je také možné, aby lidé měli chybějící chromozomy, více než jeden chromozom navíc nebo část chromozomu, která chybí nebo je duplikována. Při pohledu na pouhý počet chromozomů je možné diagnostikovat různé stavy včetně Downova syndromu.
10. Třídění chromozomů
Po určení počtu chromozomů začne cytogenetik třídění chromozomů. Při třídění chromozomů bude cytogenetik porovnávat délku chromozomů, umístění centromer (oblasti, kde jsou tyto dva chromatidy spojeny) a umístění a velikosti G-pásem. Páry chromozomů jsou očíslovány od největších (číslo 1) po nejmenší (číslo 22). Existuje 22 párů chromozomů, nazývaných autosomy, které se přesně shodují. Existují také pohlavní chromozomy, ženy mají dva chromozomy X, zatímco muži mají X a Y.
11. Pohled na strukturu
Kromě pohledu na celkový počet chromozomů a pohlavních chromozomů se cytogenetik také podívá na strukturu specifických chromozomů, aby se ujistil, že v nich nechybí ani chybějící materiál, ani strukturální abnormality, jako jsou translokace. K translokaci dochází, když je část jednoho chromozomu připojena k jinému chromozomu. V některých případech jsou zaměněny dva kousky chromozomů (vyvážená translokace) a jindy je přidán nebo chybí kousek navíc z jednoho chromozomu samotného.
12. Konečný výsledek
Nakonec konečný karyotyp ukazuje celkový počet chromozomů, pohlaví a strukturální abnormality jednotlivých chromozomů. Digitální obraz chromozomů je generován se všemi chromozomy uspořádanými podle čísel.
Meze testování karyotypů
Je důležité si uvědomit, že zatímco testování karyotypů může poskytnout mnoho informací o chromozomech, tento test vám nemůže říci, zda jsou přítomny specifické genové mutace, jako jsou ty, které způsobují cystickou fibrózu. Váš genetický poradce vám pomůže pochopit, co vám mohou testy karyotypu říci, a co ne. Jsou zapotřebí další studie k vyhodnocení možné role genových mutací při onemocnění nebo potratech.
Je také důležité si uvědomit, že testování karyotypů někdy nemusí být schopno detekovat některé chromozomální abnormality, například když je přítomen placentární mozaikismus.
V současné době je testování karyotypů v prenatálním prostředí poměrně invazivní a vyžaduje amniocentézu nebo odběr choriových klků. Vyhodnocování bezbuněčné DNA ve vzorku krve matky je však nyní běžné jako mnohem méně invazivní alternativa pro prenatální diagnostiku genetických abnormalit u plodu.
Slovo od Verywell
Při čekání na výsledky karyotypu můžete pociťovat velkou úzkost a týden nebo dva, než se výsledky dostaví, se mohou cítit jako věky. Udělejte si čas a opřete se o své přátele a rodinu. Může být také užitečné seznámit se s některými stavy spojenými s abnormálními chromozomy. Ačkoli mnoho stavů diagnostikovaných karyotypem může být zničující, existuje mnoho lidí žijících s těmito stavy, kteří mají vynikající kvalitu života.
